A mintavétel és a feldolgozási metodikák

Mintavételezés

Minta a pleuralis ?rb?l (thoracocentesis), a pericardialis ?rb?l ( pericardiocentesis) vagy a peritonealis ?rb?l (paracentesis) t?vel nyerhet?. Kevésbé gyakori, az , amikor sebészeti mellkasi vagy hasi beavatkozás során nyerünk folyadékot.

A folyadékot tiszta gy?jt?edényekben és fixálatlanul küldik a laboratóriumba. Megel?zend? a bealvadást, ami során a sejtek jelent?sen szétszóródnak, ennek következtében a megítélésük lehetetlenné válik, a folyadék heparinizált üvegben gy?jthet? be, vagy heparint lehet önteni az edénybe, miel?tt a folyadékot  levesszük. A mintákat 4 °C-ra leh?thetjük  néhány napig anélkül, hogy a cellularis morfológia megváltozna.

A feldolgozás metodikái

Számos kenet feldolgozási módszer lehetséges. A gy?jt?edényt felrázva szétoszlatjuk a sejteket és 50 ml-nyi folyadékrészt (vagy a minta egészét) centrifugáljuk. A felülúszót kidobjuk és az üledéket használjuk fel direkt kenet készítésre, cytocentrifugált készítményre, vékonyréteg? kenetekre vagy filter készítményekre. A keneteket alkoholban fixáljuk és Papanicolaou szerint festjük.

Hematológiai malignitás gyanúja esetén leveg?n szárított, cytocentrifugált készítményt használunk. Az egyiket Romanowsky-típusú festéssel festjük, a maradékot immuncytokémiai vizsgálatokra tarthatjuk fenn. Az üledék maradékát filter papírba burkoljuk és sejtblokk készítményre használjuk fel. Az üledék koagulációját segítve adjunk hozzá néhány csepp plasmát és trombin oldatot, így az üledék kompakt masszává dermed. Ha a folyadék nem volt heparinizálva és alvadékos, eltehetjük és mint sejtblokk anyag dolgozhatjuk fel.

A szenzitivitivitás javításához, a legtöbb laboratórium két vagy több módszert használ. A malignus folyadékok 65-70%-a azonosítható csupán keneteken vizsgálva, amig koncentrált módon citocentrifugálással, filterrel vagy sejtblokk készítményekkel a malignitások kb. 85 %-a mutatható ki. A sejtblokk preparátumok különösen hasznosak specialis festésekre és sokkal jobban hasonlíthatók össze a biopsziás anyaggal. Néhány laboratóriumban nagy mennyiség? malignus sejtet tartalmazó folyadékból el?ször fixálatlan, nedves,  toluidin kékkel festett kenetet készítenek.

A maradék folyadékot h?t?ben tárolhatjuk amennyiben további kenetekre lesz szükség. A friss folyadék néha más vizsgálatora is felhasználható, úgymint cytometria, elektronmikroszkópia és cytogenetikai analízis.

A vörösvértestek eltávolítására szolgáló Ficoll gradiens technika

  • Tiszta hátteret tesz lehet?vé
  • Csökkenti a nem specifikus antigén kötést
  • utófixálás Carnoyban
X