Author: Susan Van Noorden

Translated by Maria Nasioutziki

Διατήρηση των Κυτταρολογικών Δειγμάτων για Ανοσοκυτταροχημεία

Πρόλογος

Η ανοσοκυτταροχημεία είναι πλέον απαραίτητη για τη πλήρη και ακριβή μικροσκοπική διάγνωση δειγμάτων ιστού είτε blocks μονιμοποιημένων σε φορμόλη είτε κυτταρολογικών παρασκευασμάτων από ψήκτρα, απόξεση, επίχρισμα  ή αναρρόφηση δια λεπτής βελόνης. Η επιτυχία της μεθόδου εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τη μορφολογική διατήρηση των κυττάρων όπως επίσης και των αντιγόνων που θα προσδιοριστούν. Μη καλά παρασκευασμένα ή ακατάλληλα διατηρημένα επιχρίσματα ή άλλα παρασκευάσματα εξαντλούν το διαθέσιμο δείγμα, σπαταλούν αντιδραστήρια και  χρόνο, μόνο για να παρέχουν αναξιόπιστα αποτελέσματα. Γι’ αυτό η σημασία της αρχικής επεξεργασίας του υλικού είναι πολύ μεγάλη.

Περιεχόμενα

• Παρασκευή και μονιμοποίηση των δειγμάτων
• Αρχές Ανοσοκυτταροχημείας
  • Ανάκτηση αντιγόνων
  • Αποκλεισμός ενδογενούς υπεροξειδάσης
  • Αποκλεισμός μη ειδικού υποβάθρου
• Αραίωση αντισωμάτων
  • Διαλύτες
  • Βελτιστοποίηση
• Δείγματα Ελέγχου (controls)
• Εξοπλισμός
• Γενικές παρατηρήσεις για ανοσοκυτταρολογία
• Παράρτημα
  • Esposti’s διάλυμα
  • Ρυθμιστικά Διαλύματα
    • Φυσιολογικός ορός με διάλυμα φωσφορικών ιόντων
    • Τρις-ρυθμιστικός φυσιολογικός ορός
  • Διαλύτης αντισωμάτων
  • Αποθήκευση αντισωμάτων
  • Αποκλεισμός ενδογενούς υπεροξειδάσης
  • Θερμο-επαγόμενη ανάκτηση επιτόπων
    • Κιτρικό ρυθμιστικό διάλυμα
    • TRIS/EDTA ρυθμιστικό διάλυμα
    • Μέθοδος μικροκυμάτων
  • Διάλυμα διαμινοβενζιδίνης για τη ανάπτυξη της υπεροξειδάσης
  • Ανοσοκυτταροχημική μέθοδος (χειροκίνητη)